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如何選擇合適您細胞分選的MACS分選柱
更新時(shí)間：2021-07-05 瀏覽次數：6020
美天旎分選柱（Column）是MACS技術(shù)的核心，其特點(diǎn)如下：填充有不同規格的鐵珠，可分選或者去除10^7-10^10細胞；表面親水包被，不損傷細胞，同時(shí)保證流速；可以將磁場(chǎng)放大1000-10000倍，因此只需少量的細胞表位被識別即可被磁場(chǎng)捕獲，從而為后續實(shí)驗預留足夠抗原表位，如磁珠分選后的細胞無(wú)需切除磁珠即可直接染流式抗體，而不受影響。
美天旎的分選柱分幾類(lèi)，如MS、LS、LD、autoMACS column 等，那么，這些有什么區別呢，您在實(shí)驗中又該如何去選擇適合您的分選柱呢？
我們知道，美天旎的MACS分選策略有陽(yáng)性分選、去除分選，那我們就按兩種分選策略來(lái)分析如何選擇恰當的分選柱：
美天旎的分選柱分幾類(lèi)，如MS、LS、LD、autoMACS column 等，那么，這些有什么區別呢，您在實(shí)驗中又該如何去選擇適合您的分選柱呢？
我們知道，美天旎的MACS分選策略有陽(yáng)性分選、去除分選，那我們就按兩種分選策略來(lái)分析如何選擇恰當的分選柱：
陽(yáng)性分選
1、根據要分選的細胞數量選擇分選柱：
1、根據要分選的細胞數量選擇分選柱：
MS柱容納的細胞上樣量是2×10^8細胞（既包含陽(yáng)性細胞又包含陰性細胞），而其能捕獲的陽(yáng)性細胞是10^7。
LS分選柱細胞上樣量是2×10^9細胞（既包含陽(yáng)性細胞又包含陰性細胞），而其能捕獲的陽(yáng)性細胞是10^8。
2、目的細胞是常見(jiàn)細胞還是稀有細胞
為了在分選稀有細胞（表達率<5%）時(shí)得到較更高的純度，您可以使用兩個(gè)分選柱：用一根分選柱進(jìn)行一次分選后，陽(yáng)性成份再過(guò)一次新的分選柱。在陽(yáng)性分選中，過(guò)兩次分選柱可以獲得更高純度的細胞。
3、大體積的細胞
另外，如果您要分選的目的細胞是體積較大的特殊細胞，如原生動(dòng)物細胞、人皮膚郎罕式細胞、鼻咽癌細胞、心肌細胞等，那推薦您使用Large cell columns。因為大細胞柱的鐵珠間隙足夠大，容許這些特殊的大體積細胞順利通過(guò)。
LS分選柱細胞上樣量是2×10^9細胞（既包含陽(yáng)性細胞又包含陰性細胞），而其能捕獲的陽(yáng)性細胞是10^8。
2、目的細胞是常見(jiàn)細胞還是稀有細胞
為了在分選稀有細胞（表達率<5%）時(shí)得到較更高的純度，您可以使用兩個(gè)分選柱：用一根分選柱進(jìn)行一次分選后，陽(yáng)性成份再過(guò)一次新的分選柱。在陽(yáng)性分選中，過(guò)兩次分選柱可以獲得更高純度的細胞。
3、大體積的細胞
另外，如果您要分選的目的細胞是體積較大的特殊細胞，如原生動(dòng)物細胞、人皮膚郎罕式細胞、鼻咽癌細胞、心肌細胞等，那推薦您使用Large cell columns。因為大細胞柱的鐵珠間隙足夠大，容許這些特殊的大體積細胞順利通過(guò)。
去除分選
去除分選中需要考慮以下幾個(gè)因素：
1 您使用MACS isolation kits 或MACS microbeads嗎？
2 抗原表達強還是弱呢？
3 您需要更高的純度還是回收率呢？
4 您需要分選多少細胞？
根據這幾個(gè)因素，您可以選擇合適的去除分選柱。
去除分選中需要考慮以下幾個(gè)因素：
1 您使用MACS isolation kits 或MACS microbeads嗎？
2 抗原表達強還是弱呢？
3 您需要更高的純度還是回收率呢？
4 您需要分選多少細胞？
根據這幾個(gè)因素，您可以選擇合適的去除分選柱。
注意：某些MACS Cell Isolation Kits先進(jìn)性去除分選（第一步分選），然后進(jìn)行陽(yáng)性分選（第二步分選）。請使用說(shuō)明書(shū)中推薦的分選柱。
三、分選柱對應搭配的分選器（磁力架）的推薦
1、MS分選柱和Large Cell Columns，適配的分選器為單通道的miniMACS或者8通道的OctoMACS。
三、分選柱對應搭配的分選器（磁力架）的推薦
1、MS分選柱和Large Cell Columns，適配的分選器為單通道的miniMACS或者8通道的OctoMACS。
2、LS和LD分選柱或 Whole Blood Columns，適配的分選器為單通道的midiMACS或者4通道的QuadroMACS。
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