國慶長(cháng)假已經(jīng)結束~祝賀大家喜提2019年所有法定節假日，接下來(lái)又該投入忙碌的科研工作生活了！

小編在假期前的推文中留了一個(gè)“小尾巴”——“基于樣品檢測量多少的變更需要進(jìn)行適用性檢查嗎？”

（點(diǎn)擊回顧→  “國慶堵”vs“濾膜堵”）

對于這個(gè)問(wèn)題，我們的建議是：由于原來(lái)10ml的供試液較1ml的藥濃更高，如含抑菌成份則抑菌性更強，所以在方法適用性檢查上能包括濃度更低的供試液，所以建議只需走公司內部規定的變更-修改SOP和記錄流程即可，不需要重新進(jìn)行驗證。

解決完“遺留問(wèn)題”，接下來(lái)本文將以法規要求作為指導幫助大家梳理IVD行業(yè)中關(guān)于微生物監測的方法。

醫療器械生產(chǎn)質(zhì)量管理規范(GMP)在2015年10月份生效，其中有三大附錄：《無(wú)菌醫療器械》、《植入性醫療器械》、《體外診斷試劑》。

下面我將整體分析IVD行業(yè)關(guān)于公用系統和檢測樣品方面的微生物控制。

?《醫療器械生產(chǎn)質(zhì)量管理規范附錄體外診斷試劑》

2.2.3應當根據體外診斷試劑的生產(chǎn)過(guò)程控制，確定在相應級別的潔凈室（區）內進(jìn)行生產(chǎn)的過(guò)程，避免生產(chǎn)中的污染?？諝鉂崈艏墑e不同的潔凈室（區）之間的靜壓差應當大于5帕，潔凈室（區）與室外大氣的靜壓差應大于10帕，并應當有指示壓差的裝置。相同級別潔凈室間的壓差梯度應當合理。

2.2.5陰性或陽(yáng)性血清、質(zhì)?；蜓褐破返鹊奶幚聿僮?，生產(chǎn)區域應當不低于10000級潔凈度級別，并應當與相鄰區域保持相對負壓。

2.2.11潔凈室（區）的溫度和相對濕度應當與產(chǎn)品生產(chǎn)工藝要求相適應。無(wú)特殊要求時(shí)，溫度應當控制在18～28℃，相對濕度控制在45%～65%。

2.2.19進(jìn)行危險度二級及以上的病原體操作應當配備生物安全柜，空氣應當進(jìn)行過(guò)濾處理后方可排出。應當對過(guò)濾器的性能進(jìn)行定期檢查以保證其有效性。使用病原體類(lèi)檢測試劑的陽(yáng)性血清應當有相應的防護措施。

2.2.20對于特殊的高致病性病原體的采集、制備，應當按照有關(guān)部門(mén)頒布的行業(yè)標準，如人間傳染病微生物名錄、微生物和生物醫學(xué)實(shí)驗室生物安全通用準則、實(shí)驗室生物安全通用要求等相關(guān)規定，配備相應的生物安全設施。

2.3.1潔凈室（區）空氣凈化系統應當經(jīng)過(guò)確認并保持連續運行，維持相應的潔凈度級別，并在一定周期后進(jìn)行再確認。若停機后再次開(kāi)啟空氣凈化系統，應當進(jìn)行必要的測試或驗證，以確認仍能達到規定的潔凈度級別要求。

2.6.9應當制定潔凈室（區）的衛生管理文件，按照規定對潔凈室（區）進(jìn)行清潔處理和消毒，并做好記錄。所用的消毒劑或消毒方法不得對設備、容器具、物料和產(chǎn)品造成污染。消毒劑品種應當定期更換，防止產(chǎn)生耐藥菌株。

2.7.2生產(chǎn)和檢驗用的菌毒種應當標明來(lái)源，驗收、儲存、保管、使用、銷(xiāo)毀應執行國家有關(guān)醫學(xué)微生物菌種保管的規定和病原微生物實(shí)驗室生物安全管理條例。應當建立生產(chǎn)用菌毒種的原始種子批、主代種子批和工作種子批系統。

以下為內容大綱，本文將從三個(gè)方面進(jìn)行分析梳理，今天先從“潔凈度監測”方面展開(kāi)。

?1、潔凈度監測

2、溫濕度和壓差監測

3、病原微生物實(shí)驗室

一、潔凈度監測 

? 相關(guān)法規

《醫療器械生產(chǎn)質(zhì)量管理規范》

《GB 50591-2010 潔凈室施工及驗收規范》

《GBT 16292-2010 醫藥工業(yè)潔凈室(區)懸浮粒子的測試方法》

《GBT 16293-2010 醫藥工業(yè)潔凈室(區)浮游菌的測試方法》

《GBT 16294-2010 醫藥工業(yè)潔凈室(區)沉降菌的測試方法》

《ISO 14644-1：2015 潔凈室和相關(guān)受控環(huán)境 第一部分：根據粒子濃度劃分空氣潔凈度等級》

《2010年藥品GMP指南：無(wú)菌藥品》

? 粒子監測

潔凈區參考《GB 50591-2010》的要求，按照《GBT 16292-2010》方法對粒子進(jìn)行監測，級別為百級、萬(wàn)級、十萬(wàn)級，生產(chǎn)或檢測區域潔凈度不低于十萬(wàn)級。

根據《GBT 16292-2010》描述，該法規是參照《ISO 14644-1》，現新版為2015版，建議按《ISO 14644-1：2015》執行，較《ISO 14644-1：1999》和《GBT 16292-2010》，其在取樣點(diǎn)數、采樣次數、zui小取樣量、結果判定、取樣管長(cháng)度、粒子計算器符合要求均有所不同。

▲《GBT 16292-2010》

? 沉降菌和浮游菌監測

培養基和時(shí)間參考《GBT 16294-2010》，TSA在30-35℃培養不小于2天，SDA在20-25℃培養不小于5天；但zui少采樣點(diǎn)數目不應參考《GBT 16294-2010》，應參考《ISO 14644-1：2015》。

▲《GBT 16294-2010》

? 標準方面

參照醫療器械GMP，以下是沉降菌動(dòng)靜態(tài)監測0.5小時(shí)的結果，而粒子數結果判定不需要計算95%UCL；

推薦使用Merck環(huán)境監測成品培養基和MAS-100 NT浮游菌采樣器

? 監測頻率

《醫療器械生產(chǎn)質(zhì)量管理規范附錄體外診斷試劑》

2.3.1潔凈室（區）空氣凈化系統應當經(jīng)過(guò)確認并保持連續運行，維持相應的潔凈度級別，并在一定周期后進(jìn)行再確認。若停機后再次開(kāi)啟空氣凈化系統，應當進(jìn)行必要的測試或驗證，以確認仍能達到規定的潔凈度級別要求。

靜態(tài)監測要求參考《GB 50591-2010》，動(dòng)態(tài)監測根據用戶(hù)風(fēng)險評估制定；

建議動(dòng)態(tài)監測參考2010年藥品GMP指南：無(wú)菌藥品，百級每批生產(chǎn)，萬(wàn)級、十萬(wàn)級每周一次；

推薦使用TSI 9500系統便攜式粒子計數器，有28.3L、50L、100L型號，用于百級、萬(wàn)級、十萬(wàn)級潔凈區的塵埃粒子監測。內含多種標準《ISO14644-1:1999》、《EUGMP-ISO:1999》、《ISO14644-1:2015》、《EUGMP-ISO:2015》，適合制藥行業(yè)和醫療器械行業(yè)的使用。輸入”面積”、“潔凈等級”、“選擇標準”和“房間狀態(tài)”后自動(dòng)生成“通道”、“取樣量”、“位點(diǎn)數”、“取樣時(shí)間”等的數據，其數據完整性符合FDA 21 CFR PART11、Part211和212要求；

以上就是“潔凈度監測”的分析內容，下期將圍繞“溫濕度和壓差監測”展開(kāi)分析梳理，敬請期待！